Servicios
El laboratorio de Pruebas Biológicas del Instituto de Química, cuenta con equipo y personal capacitado que permite ofrecer los siguientes servicios de calidad:
- Actividad citotóxica en líneas celulares cancerosas de humano siguiendo el protocolo de Sulforrodamina B descrito por el Instituto Nacional del Cáncer de los Estados Unidos de Norteamérica.
- Determinación de nitritos en sobrenadantes de macrófagos murinos.
- Viabilidad celular en cultivos celulares de cáncer humano y células sanas de acuerdo al protocolo de la ruptura de la sal de tetrazolio (MTT).
- Toxicidad aguda en Artemia salina.
- Actividad antiinflamatoria de compuestos de naturaleza esteroidal y no esteroidal mediante los siguientes modelos:
- Edema inducido con la aplicación tópica de 13-acetato de 12-O-Tetradecanoil-forbol (TPA) en la oreja de ratón.
- Cuantificación del contenido de la enzima mieloperoxidasa en biopsias de oreja de ratón inflamada.
- Evaluación de actividad analgésica con el modelo de contracción abdominal inducida con ácido acético en ratón (Writhuing).
- Actividad antioxidante:
- Cuantificación de la reducción del radical libre 2,2-difenil-1-picrilhidrazil (DPPH).
- Inhibición de la peroxidación de lípidos inducida con FeSO4 o AAPH en homogeneizado de cerebro de rata.
- Determinación de la capacidad quelante por el método de ferrozina.
- Inhibición de la enzima alfa glucosidasa de levadura y de intestino de rata.
- Inhibición de la enzima acetilcolinesteras de anguila eléctrica (Electrophorus electricus).
- Toxicidad oral aguda con base en el protocolo de la OECD.
Nota:
Para los experimentos que involucran ratones, es responsabilidad del usuario proporcionar los animales.
Aplicaciones
- Evaluar la inhibición del crecimiento de líneas de cáncer humano en cultivo.
- Evaluar la capacidad de antioxidante de sustancias puras o mezclas.
- Determinación de la actividad antiinflamatoria de extractos vegetales y compuestos químicos orgánicos e inorgánicos.
- Todos los análisis que realiza el laboratorio son de tipo cuantitativo, para trámites ante instancias, gubernamentales y cumplir con los requisitos.
- Determinación de la toxicidad aguda en ratones y crustáceos de compuestos y extractos.
El laboratorio cuenta con el equipo y personal capacitado que permite ofrecer un servicio de calidad en la obtención de los resultados. La M. en C. Ma. Teresa Ramírez Apan y el M. en C. Antonio Nieto Camacho, son los técnicos académicos responsables de realizar los bioensayos y de apoyar al usuario del servicio en los aspectos estadísticos y de interpretación de resultados.
Equipo disponible e infraestructura
- Lector de Placas SYNERGY HT, BioTek.
- Campana de Flujo Laminar, ESCO.
- Incubadora de CO2, ESCO.
- Contador automatizado de células TC20, BIO-RAD.
- Centrífuga clínica 228, Fisher Scientific.
- Centrífuga refrigerada 5415R, Eppendorf.
- Balanza analítica BP61S, Sartorius.
- Microscopio óptico invertido DIAPHOT 300, Nikon.
- Potenciómetro 50 pH Meter, Beckman.
- Autoclave vertical, Boyer.
- El laboratorio cuenta con un bioterio para realizar las pruebas in vivo.
Requisitos de la muestra
- Las pruebas que se realizan en dos etapas: cernimiento primario (una sola concentración) y curvas concentración – respuesta (4 a 6 concentraciones). Para las curvas concentración – respuesta es necesario hacer entre tres y cinco experimentos independientes para obtener la Concentración Inhibitoria 50 (CI50) ± ESM (error estándar de la media).
- Para las muestras externas (STE, STA) que se someten a cernimiento primario el tiempo de entrega de resultados es de 3 a 4 semanas, debido a que se hacen al menos tres experimentos independientes para reportar la reproducibilidad de actividad de la muestra (Promedio ± ESM).
- Para las muestras que se someten a curvas concentración – respuesta el Investigador deberá ser informado vía telefónica o por correo electrónico que los resultados finales de la IC50 se tendrán de 1 a 3 meses dependiendo del número de líneas celulares que se sometan para la IC50 y de la cantidad de muestras en espera.
- Con el objetivo de proporcionar un servicio satisfactorio se le solicita al usuario que sus muestras cumplan con los siguientes requisitos:
- Para cernimiento primario se requiere entre 1 a 2 mg de muestra
- Para la curva de concentración-respuesta que requieren 20 mg de la muestra
- La solubilidad debe ser mayor o igual a 20 mg/mL para extractos o fracciones y de 20 mM para compuestos puros.
- Para los experimentos de citotoxicidad la muestra debe ser soluble exclusivamente en dimetilsulfóxido, etanol, metanol o agua.
- Para las demás pruebas la muestra debe ser completamente soluble en alguno de los siguientes disolventes: metanol, etanol, acetona, cloroformo, dimetilsulfóxido o agua.
- El usuario es el responsable de pesar correctamente de la muestra y de la pureza de la misma. Para curvas concentración-respuesta la muestra debe ser del mismo lote con el que se solicitó el cernimiento.
- El usuario debe garantizar que, al pesar una muestra, la incertidumbre de la pesada sea menor o igual al 10%.
Técnicos Académicos
Características de las Pruebas
Para los experimentos de citotoxicidad la muestra debe ser soluble exclusivamente en dimetilsulfóxido, etanol, metanol o agua. Para las demás pruebas la muestra debe ser completamente soluble en alguno de los siguientes disolventes: metanol, etanol, acetona, cloroformo, dimetilsulfóxido o agua.
Requisitos del servicio
Para saber cuáles son los requisitos para acceder a algún servicio, le solicitamos que se comunique con la Secretaría Técnica al correo electrónico
ventanilla_unica@iquimica.unam.mx.
Ellos le brindarán la información y el asesoramiento que necesite.
Nuestros laboratorios cuentan con un sistema de gestión de calidad bajo la norma ISO 9001:2015, certificados por Certificación Mexicana S.C. y cuentan con el reconocimiento de Calidad UNAM otorgado por la Coordinación de Gestión para la Calidad de la Investigación.
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FAQ
Para este ensayo se pueden usar ratones hembra o macho, aunque es recomendable emplear ratones machos.
Los ratones deben ser de la cepa ICR-CD1 con un peso corporal entre los 25 a 30 g.
El investigador es el responsable de suministrar los animales para sus ensayos.
Por lo general se adquieren en la UPEAL (Unidad de producción y Experimentación de Animales de Laboratorio) localizado en el plantel Xochimilco de la Universidad Autónoma Metropolitana.
Se requiere entre 1 a 2 mg de muestra para realizar el ensayo exploratorio de la actividad. Para las curvas concentración respuesta la cantidad requerida es entre 10 a 15 mg dependiendo de la prueba y de la actividad de la muestra.